快捷型植物基因组DNA提取试剂盒
产品及特点
本试剂盒适用于从多种植物的不同组织中快速提取高质量的基因组DNA,采用独特的缓冲液系统,特别适合从植物干粉或者新鲜植物材料中提取基因组DNA。提取过程不需要等有机试剂抽提,安全快捷。使用安全方便,可有效去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。对样品的起始重量没有限制,实验者可根据自己的需求灵活调整。提取的基因组 DNA大,纯度高,质量稳定可靠使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作。
它具有下列特点:
1. 简便快速:
1 小时内可获得高纯度的基因组 DNA;
2. 纯度高:可直接进行 PCR、文库构建、酶切和杂交等分子生物学实验;
3. 使用方便:安全、无毒,无需抽提。
使用方法
1. 取植物新鲜组织 50-100 mg 或干重组织约 20 mg,加入液氮充分研磨。
2. 将研磨后的粉末收集到离心管(自备)中,加入 400 μl 缓冲液QP1 和6 μl 的RNaseA(10mg/ml),旋涡振荡 1 min,室温放置 10 min。
(注 意:由于植物材料多样性非常丰富,所取实验材料的最适量需根据材料的不同,或相同材料的不同组织等进行摸索)
3. 加入 130 μl 缓冲液 QP2,充分混匀,涡旋振荡 1 min。
4. 12,000 rpm (-13,400×g )离心 5 min,将上清转移至新的离心管中。
5. 可选步骤:将上清液再次 12,000 rpm (-13,400×g )离心 5 min,将上清转移至新的离心管中。
(注 意:此步骤目的为去除上清液中的沉淀杂质,使提取基因组 DNA 纯度更高。)
6. 向上清液中加入 0.7 倍体积的,充分混匀,此时会出现絮状基因组DNA。(例如 500 μl 的上清液加 350 μl ),12,000 rpm(-13,400×g )离心2 min,弃上清,保留沉淀。
7. 加入 600 μl 70%乙醇,涡旋振荡 5 sec,12,000 rpm(-13,400×g )离心2 min,弃上清。
8. 重复步骤 7。
9. 开盖倒置,室温 5-10 min,彻底晾干残余的乙醇。
(注 意:乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR 等实验。)
10. 加入适量 Buffer EB,65℃水浴 10-60 min 溶解 DNA,其间颠倒混匀数次助溶,得到 DNA 溶液。
注意事项
1. 缓冲液 FP1 可能会发黄,并不影响提取效果。若 Buffer QP1 或Buffer QP2 有沉淀析出,可在 37℃水浴溶解,摇匀后使用;
2. 所有离心步骤均为使用台式离心机,室温下离心;
3. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA较小且提取量也下降。