mTTx RNA Probe RTqPCR MasterMix
描述:
mTTx DNA/RNA 聚合酶经电子重构架技术,改变了TTx的活性配体中心,使其在 Mg 2+条件下仍然具有极强的逆转录活性。mTTx DNA/RNA Polymerase 在 Mg 2+条件下对于DNA模板和RNA模板扩增能力几乎无偏差,该试剂为进行 RNA TaqMan RT-PCR的专用预混试剂。可以高灵敏的检测RNA分子。对于粗制样本该试剂可以直接进行检测,无需核酸纯化,尤其适用拭孖样本。
mTTx DNA/RNA Polymerase 的特性:(1)依赖于DNA模板的聚合酶活性;(2)极强的依赖于RNA模板的逆转录活性;(3)5’-3’外切酶活性,用于 TaqMan 探针切割;(4)金属配体离子为Mg 2+,通常使用浓度 2-3.5 mM;(5)相比于TTx DNA 聚合酶,mTTx的耐热性能有所下降,92℃条件下的半衰期为 30min;(6)热启动版本的 mTTx 在50℃条件下100%无活性,92℃加热5min 后恢复活性;(7)以RNA为模板进行RT-PCR 扩增的长度为280bp,扩增效率的长度为70-150bp。
储存:-20℃可保存 3 年。
注意:2×mTTx MasterMix中包含优化的反应缓冲盐、dNTP(0.2mM each)、Mg 2+(5mM),10%甘油,0.1 U/μl的HotStart mTTx DNA/RNA Polymerase, 为2倍浓度。
反应实例:
1.按以下组分配制 RT-qPCR 反应液
注意:mTTx的变性温度为92℃,其它温度条件都会导致试剂性能下降。逆转录步骤的温度可根据实际情况在58-70℃调整。