2GS Taq Master Mix
保存条件:
-20℃保存 24 个月。
产品简介:
本产品包含 Taq DNA Polymerase、dNTPs 以及优化的缓冲体系,浓度为 2×, 只需要添加引物、模板和 ddH2O 即可进行 PCR 扩增。本产品相对于普通 Taq PCR Mix 具有更高的产量及扩增性能,可有效扩增 5 kb 以内的 DNA 段。体系中包含有蓝色电泳指示剂,可在扩增完成后直接上样进行电泳检测,其迁移速度在 1% TAE 琼脂糖凝胶中与 500 bp 双链 DNA 段相近。
使用本产品扩增的产物是混合末端,纯化后可用于平末端克隆,也可用于黏末端克隆。
产品特点:
操作简单:2×Mix,只需要添加引物、模板和 ddH2O 即可进行 PCR 扩增;
产 量 高:相对普通 Taq PCR Mix 具有更高的产量;
耐受性好:对抑制物有较好的耐受度;
适用性广:对多种模板均有良好的扩增性能。
适用范围:
适用于常规 PCR 扩增。
注意事项:
1. PCR Mix 应避免反复冻融,短期内多次使用可置于 4℃保存;
2. 当产物产量较低时,可通过增加延伸时间或循环数来改善;
3. 本产品不可用于细菌 16S 鉴定。
常见问题与解决办法
Q1:扩增无产物或产物量少?
A1:
(1) 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量,使用高质量模板;
(2) 模板浓度过低。适当增加模板用量;
(3) 引物不合适。优化引物设计;
(4) 退火温度不合适。设置退火温度梯度,摸索合适的退火温度;
(5) 循环数过少。适当增加 5~10 个循环;
(6) 延伸时间不足。复杂模板可适当增加延伸速度至 20~30 s/kb。
Q2:扩增出现非特异条带或弥散带?
A2:
(1) 引物特异性差。优化引物,避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增;
(2) 引物浓度过高。降低引物浓度;
(3) 模板过量或纯度差。减少模板量,使用高质量模板;
(4) 退火温度过低。适当提高退火温度或使用 Touchdown PCR 程序;
(5) 循环数过多。减少循环数至 25~30 cycles。